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尊龙凯时聚丙烯酰胺凝胶电泳原理解析

发布时间:2025-04-03   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时所提供的电泳技术在生物医疗领域中扮演着重要角色,尤其是不同pH值、离子强度、缓冲成分或凝胶孔隙大小的凝胶电泳技术。该技术旨在提升电泳分离的范围和分辨率,使得分子分析更加精细。

尊龙凯时聚丙烯酰胺凝胶电泳原理解析

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳采用多种缓冲成分、pH值和不同孔径的凝胶,在电泳过程中形成不均匀的电位梯度。这一过程带来了浓缩效应、电荷效应和分子筛效应,为生物分子的分离提供了基础。

1. 浓缩效应

在电泳开始时,样品经过浓缩胶被浓缩成高浓度的样品薄层(通常可达几百倍),随后进入分离阶段。通电后,样品胶与浓缩胶之间的离子迁移率差异明显,其中Cl–离子的解离度最大,因此其迁移率最快,被称为快离子。解离度次的蛋白质紧随其后,而解离度最低的甘氨酸离子(pI=6.0)则位于后方,泳动速度最慢,成为慢离子。快离子的快速移动使得其后形成低离子浓度区,从而引起高电势梯度,致使蛋白质和慢离子加速移动。这一高电势梯度区域的快速迁移形成了蛋白质的集中带,当它们通过小孔径的分离胶时,已形成一层薄膜。

2. 电荷效应

当甘氨酸离子与其他各种离子进入pH 8.9的小孔径分离胶后,其电泳迁移率迅速超过蛋白质。此时,高电势梯度逐渐消失。在均一电势和pH条件下,由于不同蛋白质的等电点各异,它们所带的电荷量也不同,因此在电场作用下受到的引力也有所差异。经过一定时间的电泳,各种蛋白质便依次排列成特定的区带。

3. 分子筛效应

分离胶的孔径较小,导致不同分子量与形状的蛋白质在通过分离胶时受到不同程度的阻滞,最终表现出不同的迁移率。分子筛效应解释了样品经过特定孔径凝胶时的分子迁移行为:小分子移动较快,大分子相对较慢,从而使不同类型的蛋白质按分子大小顺序排列成相应的区带。

尊龙凯时致力于为生物医疗领域提供高效、精准的电泳技术,助力科研与临床应用的蓬勃发展。