尊龙凯时推出的细胞培养指南介绍了293T细胞，这是一种源自人胚肾细胞的细胞株，最初被称为293tsA1609neo，是通过插入SV40 T抗原的温度敏感基因而获得的高转导衍生株。

细胞基本信息

细胞名称：人胚肾细胞
细胞别名：Hek293T; HEK-293T; HEK293T; HEK-293-T; 293-T
种属来源：人
组织来源：肾
细胞形态：上皮细胞样
生长特性：贴壁生长
培养体系：MEM + 10% FBS + 1% P/S
传代比例：1:2 ~ 1:4，每2-3天更换培养基
培养条件：气相：95%空气 + 5%二氧化碳，温度：37℃
冻存条件：冻存液：60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO；存储于液氮
安全性：建议在生物安全柜中进行操作，并做好个人防护。

复苏及传代方法

1.细胞株的复苏（冻存管）

1. 将冻存管在37℃水浴中迅速完全融化，轻轻摇晃以促进融化。快速的融化可提升复苏效果。
2. 使用75%酒精擦拭冻存管外壁。
3. 将融化的细胞离心，或转移至无菌离心管中，400g离心5分钟，弃去上清，注意不要吸走细胞沉淀，然后用新鲜完全培养液重悬，并转移至培养器皿，混匀后置于CO2培养箱37℃培养。
4. 第二天根据细胞的贴壁或生长状态更换培养液。如若收到的冻存管无法及时复苏，应暂存于-80℃或液氮中，尽快复苏。

2.细胞株的复苏（T25瓶）

1. 从T25瓶去除外包装后，用75%酒精擦拭瓶外壁。
2. 倒置显微镜下观察细胞状态，确认无异常后，移去多余培养液，置于CO2培养箱中，37℃培养过夜。
3. 第二天观察细胞贴壁或生长情况，决定是否需要更换培养液或进行传代，传代比例建议为1:2 ~ 1:4。

注意事项

1. 每支冻存管约含1×10⁶个细胞，体积为1ml，预期存活率为60-90%。建议复苏至一个T25瓶或一个6cm培养皿中。若复苏后存活率较低，可消化后转移至35cm培养皿或T125瓶中，以促进细胞生长。
2. 如果细胞处于常温运输且培养瓶内充满完全培养液，收到后需：
（1）及时记录是否有泄漏或瓶身破损现象。
（2）用75%酒精擦拭细胞培养瓶，显微镜下观察细胞状态。初次不要打开培养瓶盖，将细胞静置于培养箱中培养2-4小时以恢复状态。
（3）仔细阅读细胞说明书，了解相关信息。
（4）观察后拍照记录细胞状态。
3. 若细胞密度超过85%，请尽快进行传代；若悬浮细胞较多，请将培养瓶静置过夜以促进贴壁。如果收到的是常温运输的离心管装悬浮细胞，可以直接转移至培养皿或培养瓶中。如果培养液颜色正常，则保留原液继续培养，并在首次更换培养液时，保留一半原培养液，添加一半新鲜培养液，以避免因培养液或血清差异造成的不适应，确保良好的生长状态。
4. 所有细胞培养操作请在生物安全柜中进行，并严格遵循无菌操作规范。