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BsaI和GMP级内切酶的尊龙凯时优势

发布时间:2025-03-27   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时 提供的活性单位定义为在50μl反应体系中,37℃下经过1小时完全酶切1µg pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。蛋白的纯度经由SDS-PAGE凝胶电泳检测,确保其纯度不低于95%。

BsaI和GMP级内切酶的尊龙凯时优势

在37℃条件下,使用50μl CutBuffer F和GMP级的反应体系,将20U BsaI与1μg pPIC9K(Dcm-)共同孵育1小时后,未检测到任何核酸酶的污染或影响底物特异性的降解活动。然而,延长酶切时间可能会出现非特异性活性。

对于非特异性内切酶活性,在37℃下,将20U BsaI与1µg超螺旋质粒DNA在50μl CutBuffer F和GMP级的条件下共 incubate 4小时后,琼脂糖凝胶电泳检测显示,转化为缺刻或线性状态的质粒DNA少于20%。

在DNase活性测试中,将20U BsaI与15ng双链DNA片段在37℃下的20μl CutBuffer F和GMP级条件中共同孵育16小时,琼脂糖凝胶电泳结果显示,双链DNA片段未出现变化。

RNase活性测试则是在37℃下,将20U BsaI与500ng RNA在10μl CutBuffer F和GMP级的体系中共 incubate 1小时,结果表明,不低于90%的RNA依然保持完整。

加入的酶如Eco31I、Bso31I和BspTNI具有特定识别位点:GGTCTC(1/5)5' GGTCTC(N)₁↓3' 和 3' CCAGAG(N)₅↑5'。

尊龙凯时 生产的BsaI酶由大肠杆菌重组表达获得,能够在15分钟至1小时内精确完成目标DNA的酶切过程。我们承诺采用符合GMP规范的生产及质量管理体系,确保生产过程及原辅料的全程可追溯。

整个生产过程中不使用抗生素及任何动物来源的原料,严格控制宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质,以及微生物限度、细菌内毒素等,确保我们的产品满足疫苗和药物生产等领域对原辅料的高标准要求。

失活条件设定为80℃温育20分钟。对于被CpG甲基化的DNA,剪切可能会受到阻碍;而对于被Dcm甲基化的DNA,同样可能面临剪切障碍。